PERHITUNGAN KOLONI BAKTERI

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI DASAR

PERCOBAAN VI : PERHITUNGAN KOLONI BAKTERI

BAB I

PENDAHULUAN

A.    Latar Belakang

Pertumbuhan mikroorganisme yang  membentuk koloni dapat dianggap bahwa setiap koloni yang tumbuh berasal dari satu sel, maka dengan menghitung jumlah koloni dapat diketahui penyebaran bakteri yang ada pada bahan.

Untuk menentukan jumlah mikroba yang hidup dapat dilakukan setelah larutan bahan atau biakan mikroba diencerkan dengan faktor pengenceran tertentu dan ditumbuhkan dalam media dengan cara - cara tertentu tergantung dari macam dan sifat - sifat mikroba.

B.     Tujuan

1.      Mengetahui jumlah bakteri yang mengkontaminasi ketiga sampel percobaan.

2. Dapat mengetahui cara melakukan teknik pengenceran yang bertujuan untuk meminimalisirkan jumlah koloni bakteri yang terkandung pada sampel yang akan digunakan.

BAB II

PEMBAHASAN

A.    Hari/Tanggal, Judul

Hari                       : Jum’at

Tanggal                 : 01 November 2013

Tempat                  : Laboratorium Biologi, FKIP UMP

B.     Alat dan Bahan

1.      Alat :

a)      1 Erlenmayer

b)      5 tabung reaksi

c)      5 cawan petri yang sudah terdapat medium NA

d)     Pipet tetes

2.      Bahan :

a)      Sampel air

b)      Air kemasan lokal

c)      Air galon

d)     Air matang

e)      Air steril

C.        Cara Kerja

1.      Siapkan alat dan bahan yang akan digunakan dalam pengenceran.

2.      Pada tabung reaksi masing- masing diberi tanda mulai dari tabung 10^-1 sampai tabung 10^-5 .Susun kelima tabung reaksi secara teratur dari 10^-5 sampai 10^-5.

3.      Isi tabung reaksi dengan air steril masing-masing berisi 9 ml.

4.      Ambil sampel air matang yang pertama dari erlenmayer dengan menggunakan pipet tetes dan kemudian tetesi masing-masing tabung reaksi dengan sampel berkisar 1ml kemudian usahakan sampel merata dengan air yang berada pada tabung reaksi dengan cara mengguncang tabung secara perlahan.

5.      Tuangkan masing-masing sampel yang berada pada lima tabung ke masing-masing cawan yang sudah disiapkan.

6.      Lakukan langkah diatas untuk pengenceran pada sampel air yang lainnya.

Perhatikan gambar berikut :                  

                1 ml                   1 ml               1 ml               1 ml                1 ml

 

Sampel air yang                        mengandung bakteri    10-1             10-2                 10-3                10-4                     10-5 Sampel yang digunakan

                                                                                            

dibungkus dengan kertas sampul kemudian diinkubasi                                                       lalu diinkubasi.

 

                                                                                                              

                         

Sampel 10-4 dan 10-5

 

                        Gambar 2.1 Langkah – Langkah Pengenceran

7.      Setelah itu, bungkus cawan-cawan petri tersebut dengan kertas sampul lalu diinkubasi.

8.      Untuk perhitungan digunakan pengenceran dengan 10^-4 dan 10^-5.

BAB III

HASIL DAN PEMBAHASAN

A.    Hasil

Tabel 3.1 Sampel Air Galon

Gambar	Pengenceran
Gambar 3.1   Sampel Air Galon Pengenceran 10-4	Pengenceran 10-4
Gambar 3.2   Sampel Air Galon Pengenceran 10-5	Pengenceran 10-5

Tabel 3.2  Hasil Pengamatan Sampel Air

No	Sampel	Pengenceran	Jumlah koloni dalam petri disk	Jumlah bakteri dalam ml (cfu/ml)
1	Air matang	10-4	104	2.0x105 cfu/ml
		10-5	147
		147-104:2 = 2,0
2	Air galon	10-4	127	127x104 cfu/ml
		10-5	TBU
3	Air kemasan	10-4	209	209x104cfu/ml
		10-5	304
		= 209, karena mendekati 300

B.     Pembahasan

Mikroba memiliki karakteristik dan ciri yang berbeda-beda di dalam persyaratan pertumbuhannya. Mikroba seperti makhluk hidup lainnya memerlukan nutrisi pertumbuhan. Pengetahuan akan nutrisi pertumbuhan ini akan membantu di dalam mengkultivasi, mengisolasi, dan mengidentifikasi mikroba.

Ada mikroba yang bisa hidup hanya pada media yang mengandung bahan tertentu dan ada pula yang tidak mampu hidup dan seterusnya.

Karakteristik persyaratan pertumbuhan mikroba inilah yang menyebabkan bermacam-macamnya media penunjang pertumbuhan mikroba.

Dalam percobaan ini, medium yang digunakan untuk pertumbuhan mikroba adalah media NA yang terdapat di dalam 5 cawan petri. Media agar adalah media yang umum digunakan untuk menumbuhkan bakteri.

Melihat hasil pengamatan yang diperoleh, dapat dipastikan bahwa kondisi media yang digunakan tidaklah sama. Dapat dilihat pada hasil pengamatan, bakteri yang tumbuh pada cawan pengenceran 10^-4  lebih sedikit dibandingkan bakteri yang tumbuh pada cawan pengenceran10-5.

Ada beberapa persyaratan dalam perhitungan bakteri yaitu sebagai berikut:

1.      Hitung jumlah koloni.

2.      Hanya yang memenuhi syarat yang dihitung ( antara 30 – 300 ), jika tidak ada memenuhi syarat maka pilih mendekati 300.

3.      Spreader tidak dihitung.

4.      Hitung jumlah koloni termasuk yang kecil, catat pengenceran yang digunakan dan hitung jumlah koloni.

5.      Jika petri dari semua pengenceran menunjukkan jumlah koloni kurang dari 30, catat jumlah aktual koloni pada pengenceran yang paling rendah dan laporkan sebagai dugaan cfu/g.

6.   Jika pada semua pengenceran tidak dijumpai adanya koloni yang tidak terdapat senyawa penghambat, laporkan jumlah dugaan dengan kurang dari (<) pada pengenceran yang paling rendah.

Dari hasil pengamatan dari ketiga sampel air, diketahui bahwa pada pengenceran 10^-5  air kemasan paling banyak terdapat  bakteri. sedangkan, untuk jumlah koloni yang sedikit terdapat dalam pengenceran 10^-4 air matang.

BAB IV

PENUTUP

A.    KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pengamatan yang telah dilakukan maka dapat disimpulkan bahwa :

1.      Pengenceran sampel air matang pengenceran 10^-4  dan 10^-5  Jumlah koloni dalam petri disk masing- masing berjumlah 104 dan 147 dan jumlah bakteri dalam ml (cfu/ml) adalah 2.0 X 10⁵  .

2.      Pengenceran sampel air galon pengenceran 10^-4  dan 10^-5  Jumlah koloni dalam petri disk masing- masing berjumlah 127 dan TBU dan Jumlah bakteri dalam ml (cfu/ml) adalah 127 X 10⁴. 

3.      Pengenceran sampel air kemasan pengenceran 10^-4  dan 10^-5  Jumlah koloni dalam petri disk masing- masing berjumlah 209 dan 304 dan Jumlah bakteri dalam ml (cfu/ml) adalah 209 X 10⁴.

B.     SARAN

Adapun saran dari praktikum ini adalah sebagai berikut:

1.      Sebelum melakukan praktek di laboratorium sebaiknya praktikan mempelajari terlebih dahulu teori untuk mengetahui jumlah koloni bakteri pada sampel air.

2.      Sebaiknya praktikum mengenai penghitungan jumlah koloni bakteri ini dilakukan lebih serius lagi dan bagi mahasiswa yang mengikuti praktikum seharusnya dilengkapi dengan masker dan juga sarung tangan.

DAFTAR PUSTAKA

Pelczar et al  , 2010 .  Dasar  -  dasar  Mikrobiologi   .    Jakarta    :    UI  Press .

Yulneriwanti         .     2013      .      Pertumbuhan      Mikroba          .    (online) .

http://HitungMikro.blogspot.com         Diakses    13     November     2013 

Anonim    .     2007    .      Perhitungan     Mikrobia     .      ( online )               .

http://www.firebiology07.wordpress.com       Diakses 12 November 2013